回答1、方法:準(zhǔn)備好鑷子、EP管、槍頭等工具,并進(jìn)行殺菌處理;手和鑷子用酒精擦拭消毒,用鑷子取出約10支的EP管放到試劑盒里;找到移液槍,取出50%的甘油(等體積蒸餾水加等體積甘油,甘油需要慢慢吸)放到EP管里面,再取出菌種放到EP管里面;最后把所有的菌種都裝入到一個(gè)大袋子里蓋好蓋子標(biāo)注好保存起來(lái),放入-20℃的冰箱里保存。2、溫度要求:長(zhǎng)期保存,建議在-70℃下凍存;短期保存,可在-20℃保存。
一、甘油保存菌種的方法
1、原料/工具
甘油、鑷子、EP管、移液槍。
2、方法/步驟
(1)準(zhǔn)備工具并殺菌:準(zhǔn)備好鑷子、EP管、槍頭等工具,把這些工具放到高壓滅菌的鍋里進(jìn)行殺菌。
(2)把EP管放入試劑盒:用酒精將手和鑷子擦拭消毒,用鑷子取出約10支的EP管放到試劑盒里。
(3)把甘油和菌種放入EP管:找到移液槍,取出50%的甘油(甘油稀釋至50%濃度的方法:等體積蒸餾水加等體積甘油,甘油需要慢慢吸)放到EP管里面,再取出菌種放到EP管里面。
(4)保存并放入冰箱:把所有的菌種都裝入到一個(gè)大袋子里蓋好蓋子標(biāo)注好保存起來(lái),放在-20℃的冰箱里保藏。
二、甘油保存菌種的溫度
1、甘油保存菌種,若是長(zhǎng)期保存,建議在-70℃下凍存,保藏時(shí)間一般為2-4年左右;在-20℃保存時(shí)間較短,通常只有1年左右。目前實(shí)驗(yàn)室大都采用-80℃(-70℃)冰箱保藏。
2、甘油冷凍保藏菌種是目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用最為廣泛的一種的菌種保藏方法,原理是以甘油為保護(hù)劑,低溫冷凍條件下,使微生物的新陳代謝趨于停止,從而達(dá)到長(zhǎng)期有效的保藏。一般來(lái)說(shuō),保藏溫度越低,保藏效果越好。這種方法適用于一般細(xì)菌的保存,同時(shí)也適用于鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種。