回答1、菌種保藏的原理：菌種保藏有多種方法，其原理大多大同小異，主要是人為創(chuàng)造條件盡量降低生物體內(nèi)的代謝活動(dòng)，以達(dá)到延長(zhǎng)生命、減少變異的目的，其中低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素。2、菌種保藏方法：菌種保藏常用的方法有凍干保藏法、液氮保藏法、甘油管冷凍保藏法、傳代培養(yǎng)保藏法、寄主保藏法、載體保藏法等。

一、菌種保藏的原理

1、菌種保藏的原理是根據(jù)菌種的生理生化特性，人為創(chuàng)造條件盡量降低生物體內(nèi)的代謝活動(dòng)，以達(dá)到延長(zhǎng)生命、減少變異的目的。在保藏過(guò)程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài)，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。

2、低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，因此菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個(gè)因素而設(shè)計(jì)的。其中低溫可減緩機(jī)體細(xì)胞的酶活，降低新陳代謝，達(dá)到保藏菌種的目的，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致菌體誘發(fā)菌絲自溶機(jī)制。

二、菌種保藏方法

常用的方法有凍干保藏法、液氮保藏法、甘油管冷凍保藏法、傳代培養(yǎng)保藏法、寄主保藏法、載體保藏法等。

1、凍干保藏法

凍干保藏法是最有效的方法之一，具體為：先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥），其中真空冷凍干燥法最常見(jiàn)。

2、液氮保藏法

液氮保藏法，又稱為超低溫保藏法，主要利用微生物在低于-130°C的低溫下新陳代謝趨于停止的原理，在液氮中（-196°C的超低溫下）有效地進(jìn)行菌種保藏的方法。該方法一般可保藏15年以上，是公認(rèn)的菌種長(zhǎng)期保藏技術(shù)之一。

3、甘油管冷凍保藏法

甘油管冷凍保藏法，利用微生物在甘油中生長(zhǎng)和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的。該方法適用于一般細(xì)菌的保存，同時(shí)也適用于鏈球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌種，適用范圍廣，操作簡(jiǎn)便，效果好，無(wú)變異現(xiàn)象發(fā)生。

4、傳代培養(yǎng)保藏法

傳代培養(yǎng)保藏法，又稱定期移植保藏法，包括斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等，是指將菌種接種于適宜的培養(yǎng)基中，最適條件下培養(yǎng)，待菌種生長(zhǎng)完全后，通常置于4℃-6℃進(jìn)行保存并間隔一定時(shí)間進(jìn)行移植培養(yǎng)的菌種保藏方法。

5、寄主保藏法

寄主保藏法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法，必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代，尚不能用于在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等。

6、載體保藏法

載體保藏法，將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。